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一、提取精子和卵子阶段——取卵困难
在此阶段最常出现的问题就是取卵困难，取卵困难的主要原因是因为患者的卵巢功能不佳，对刺激促排卵药物不起反应，或反应很差，以至卵巢不能产生足够数量的成熟卵子。影响女性卵巢功能的因素除了年龄之外，还与个体之间的差异有关。此外，卵巢囊肿剥除术、卵巢电凝术等卵巢手术可严重破坏卵巢结构，损坏卵巢的功能。
对于广大女性朋友来说，要尽可能的避免这些会影响卵巢功能的手术，实在必须进行的应尽可能多保留卵巢组织，避免进行卵巢切除。而对于由于卵巢功能不佳的患者，则可以通过选有针对性的促排卵方案因症而治，科学取卵。
二、胚胎形成的阶段——受精失败，无法形成优秀胚胎
在做试管婴儿时，大约有20％的患者会出现受精失败。出现受精失败的原因大致有两种：一是精子无法进入卵子，影响精卵正常结合。二是当精子进入卵母细胞后，卵母细胞激活失败，导致受精卵无法分裂。优秀的胚胎是成功的重要条件，不受精或受精而不卵裂都不能完成胚胎移植，也因而造成了试管婴儿的失败。
由于精子质量差导致的无法成功受精，目前可以通过单精子注射（第二代试管婴儿技术）直接将精子注射入卵母细胞胞浆内，达到受精的目的，可降低在胚胎形成阶段造成的手术失败几率。
三、胚胎移植阶段——植入的胚胎着床失败
移植的胚胎没有办法着床成功，对病人而言是很大的打击，也困扰着施术的医生。甚至有些不孕症患者屡做屡败，除了钱财的花费外，对患者身心的创伤也非常大。那么为什么移植的胚胎不能着床呢？
1、子宫内膜接纳胚胎的能力下降，如子宫结构异常、子宫内膜薄、子宫腔持续积水、子宫内膜细胞分泌的黏着蛋白的品质不好或是量不足、子宫腔内某种细胞素的量太多或太少、有自体免疫疾病或有血栓形成体质和习惯性流产等，都会影响胚胎着床。
2、胚胎本身的问题。如夫妻双方或单方染色体有异常，或染色体正常而基因异常都会影响胚胎的发育，使胚胎长到某一阶段即会停止生长；包围卵子的透明带变厚及变硬；体外培养环境不好，包括培养液不良、温度不当或操作技术欠佳，都可能损害胚胎，引起胚胎着床失败。
四、其他原因
1、患者年龄问题
年龄是决定试管是否成功的关键，也直接影响到试管手术的各个阶段。一般来说，年龄偏大的患者，由于身体的机能下降，卵子质量也会有所下降，对试管的成功率有影响。因此，建议有意选择试管婴儿的女性最好选择在35岁以前进行。因为在35周岁以后，不仅成功率会大幅下降，顺产率也明显下降。在IVF治疗中，高龄患者流产率大大增加，早产、死胎都高于年轻孕妇。
2、患者心理及所处生活环境
患者的心理和精神状态是影响试管婴儿成功成败与否的一个重要的因素。据国外有关调查资料显示，心理压力过大的妇女，她们的内分泌会受到影响，血管长期处在收缩状态，影响了子宫、卵巢局部的血流；神经系统的紧张会使一些神经介质释放出现异常，造成子宫、输卵管肌收缩紊乱，造成胚胎不能着床而导致试管失败。所以在接受试管婴儿手术的过程中，患者要尽量保持平和的心态，同时家人与朋友也要尽力营造出一个良好的生活环境，全程配合患者的治疗，避免由于患者心理因素的影响造成移植手术的失败。
3、所选专家的经验值、生殖中心环境等
在试管手术过程中，医院专家的技术水平也直接影响到试管婴儿的成功。选择技术过硬、有资历、经验丰富的专家，能根据患者个体差异在促排卵、药物调节等多方面的调整，最大程度保证试管移植过程的顺利进行，避免由于操作的失误而造成的手术失败。此外，生殖中心实验室质量控制、技术操作熟练程度、材料的质量、仪器的稳定性等多种因素都是决定手术成功失败与否的重要因素。